《表1 引物序列:BCYRN1对结直肠癌转移表型的影响及其机制探讨》

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《BCYRN1对结直肠癌转移表型的影响及其机制探讨》


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TRIzol法抽提组织或对照组及实验组细胞总RNA,20μl无核酶水稀释,配置逆转录反应液,加入1μg总RNA,37℃、15 min,85℃、5 s,4℃保存,得到c DNA模板。适量无核酶水稀释BCYRN1、Snail、E-cadherin及β-actin q PCR引物,引物序列如表1所示。反应体系:5μl c DNA逆转录产物,5μl q PCR引物及10μl SYBR Premix Ex TaqⅡ荧光染料,设置3个重复孔,q PCR反应检测各组细胞CT值,反应条件:95℃、10 s,95℃、10 s,60℃、60 s(×40),β-actin为内参基因,2-△△CT法计算组织及细胞中BCYRN1、Snail及E-cadherin mRNA的相对表达量。