《表1 qRT-PCR扩增引物序列》

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《食管鳞癌组织中miR-125a和miR-125b的表达及其与临床病理特征的关系》

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将所提取的RNA应用PrimeScript RT reagent Kit试剂盒，以37℃15 min，85℃5 s的反应条件合成cDNA。随后按照SYBR Premix Ex TaqⅡ试剂盒使用说明书，以合成的cDNA为模板进行实时定量PCR。反应条件为:95℃5min变性；95℃10 s，58℃10 s，72℃10 s，共45个循环。溶解曲线分析:95℃5 s，50℃1 min，97℃（1个循环），40℃30 s冷却。以U6作为内参，2-ΔΔCt分析miRNA的相对表达水平。实验重复3次，每次每个样本3个复孔。引物序列见表1，均购自Ri BoBio公司。