《表2 部分重组木聚糖酶的构建情况》

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《木聚糖酶的研究进展及其在食品领域的应用》

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ND：研究中未说明。

由于天然微生物产木聚糖酶存在诸多限制，例如，天然优良菌株的筛选工作量巨大且耗费时间长，且产生的木聚糖酶产率低、成本高。因此越来越多的研究采用生物技术，将木聚糖酶基因在真核或原核系统中异源表达，解决天然菌株产木聚糖酶的各种不足。如表2所示，将木聚糖酶基因克隆到大肠杆菌（Escherichia coli）、巴斯德毕赤酵母（Pichiapastoris）或其他菌株中使其高效异源表达。在Escherichia coli中异源基因进行表达具有培养简单、生产周期短、遗传背景清楚等优点，因此成为木聚糖酶基因异源表达研究中使用的主要宿主。例如，熊科等[33]将教酒链霉菌L1105木聚糖酶基因xyA导入到Escherichia coli BL21中进行异源表达，通过优化异源表达条件使教酒链霉菌L1105木聚糖酶酶活力值提高了11.43倍。枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）作为一种安全的表达系统，没有明显的密码子偏爱性，有很强的蛋白分泌能力并且许多蛋白都能直接分泌到培养基中易于纯化，也使其成为木聚糖酶基因异源表达的宿主之一。郑春阳等[34]将Thermopolyspora flexuosa木聚糖基因导入到Bacillus subtilis获得了最适反应温度为80℃和最适反应pH值为6.0的木聚糖酶。以真菌为宿主的蛋白表达系统可分为酵母菌表达系统和丝状真菌表达系统。其中Pichiapastoris具有遗传稳定、表达高效、产物可分泌到培养基中等优点，已成为一种被广泛使用的外源蛋白表达系统[35]。例如，杨然等[36]将枝链霉菌L200木聚糖酶基因导入到Pichiapastoris GS115中，对重组Pichiapastoris的木聚糖酶菌株筛选得到菌株7-111，通过高密度发酵条件的优化重组后的菌株7-111产量高达8459U/mL。工程菌的木聚糖酶具有活性更高、耐高温耐酸碱、易于纯化等诸多优点，已经逐渐成为木聚糖酶批量生产的主要技术手段。