《表1 制作标准曲线时的试剂添加量表（单位：mL)》

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《酶比色法和雷氏盐分光光度法在测定婴幼儿乳粉中胆碱的比较》

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取5 g实验样品奶粉，将其轻轻倒入100 mL锥形瓶中，并且注入30 mL的盐酸溶液，盖上锥形瓶的盖子，将锥形瓶放在70℃热水中水解3 h，期间每隔30 min摇晃一次，最后冷却。用氢氧化钠溶液将锥形瓶中溶液的pH值调到3.5～4.0，然后将锥形瓶内混合液倒入容量为50 mL的容量瓶中，并加入蒸馏水定容，用滤纸过滤水解液至100 mL烧杯中。取4个容量为10 mL的容量瓶，分别加入2、4、6、8 mL的胆碱氢氧化物标准溶液，然后分别加入蒸馏水，稀释至10 mL，浓度分别为50、100、150、200μg/100 mL。再取出6支试管，其中一个试管用来存放空白试剂（A），剩下5支试管，编上好试管的顺序（1、2、3、4、5），分别用来存放标准溶液以及稀释的溶液，按表1加入试剂。将每个试样准备2支试管（B、C），试管B加0.1 mL待分析滤液和3 mL蒸馏水，试管C加0.1 mL待分析滤液和3 mL发色剂。使用密封膜封住试管（1、2、3、4、5、A、B、C），把试管中的混合物摇匀，然后置试管于37℃的水中反应15 min，然后冷却到室温。为了忽略蒸馏水吸光值的影响，在波长505 nm处单独测量蒸馏水吸光值。测定不同浓度标准溶液在505 nm波长处的吸光值，以6支试管的胆碱溶液浓度为横坐标、纵吸光值减去蒸馏水吸光值为纵坐标绘制标准曲线。