《表1 重组蛋白Tfu Dy P的飞行时间质谱分析》
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《褐色嗜热裂孢菌脱色过氧化物酶的表达及发酵条件优化》
注:DYP THEFY;MASS:45957;Score:432;Matches:6(5);Sequences:6(6)Dye-decolorizing peroxidase Tfu_3078 OS=Thermobifida fusca(strainYX)GN=Tfu_3078 PE=1 SV=1。
将含有全长1 293 bp的目的基因的pET28a(+)-Tfu DyP和空载pET28a(+)质粒分别转化至E.coli BL21中进行异源表达。收集菌体、破碎、离心、分离纯化,将粗酶液和纯化后蛋白进行SDS-PAGE电泳确定目的蛋白表达情况。结果如图2,有明显的目的蛋白条带,分子质量约为46 kDa,与理论计算值一致。将目标条带割胶回收,进行MALDI-TOF质谱分析[18],检测数据库为SwissProt 201704(554241 sequences;198410167 residues),与库中理论质量为45 957 Da的dye-decolorizing peroxidase Tfu_3078 OS=Thermobifida fusca匹配,匹配分数为432(表1),确定重组TfuDyP在E.coli BL21成功表达。
图表编号 | XD0075037000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.07.15 |
作者 | 朱竹兵、孙亚武、唐蕾 |
绘制单位 | 工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)、江南大学生物工程学院、工业生物技术教育部重点实验室(江南大学)、江南大学生物工程学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |