《表1 上样泵液相色谱梯度洗脱条件》

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色谱柱:Aglient Eclipse XDB-C18,规格150 mm×4.6 mm,粒径5μm,富集柱:C18的预柱。分析泵流速:1.0 mL/min;进样体积100μL;柱温为30℃。检测波长:激发波长280 nm;发射波长450 nm。分析泵流动相:A为0.1%三氟乙酸溶液(p H=3.0) ,B为乙腈溶液,流动相比例为A+B=88+12。运行时间35 min。上样泵流动相采用甲醇-水的二元溶液。采用溶剂梯度和流速梯度相结合的方式,具体见表1。阀切换:0~1 min:阀处于位置1,分析泵直接与分析柱联通,平衡色谱柱,上样泵将待处理的样品从自动进样器推到富集柱上进行富集和净化;1~2 min:阀处于位置2,分析泵与富集柱联通,将富集在柱头的待测样品反着冲到分析柱上进行分离分析,富集泵直接排废液;2 min以后:阀处于位置1,分析泵继续完成分离分析,富集泵与富集柱相连,冲洗并平衡富集柱,以备下一次上样。