《表1 本研究所用引物及序列》

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《小麦RF2类bZIP转录因子TabZIP3参与植物盐胁迫反应》

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注:下划线所示为酶切位点。

将小麦品种中国春培养至两叶一心，用16.7%PEG6000处理2 h，取其叶片用TRIZOL Reagent（Invitrogen，USA）提取总RNA，用SuperscriptⅢReverse Transcriptase（Invitrogen，USA）反转录成cDNA。3'和5'RACE按SMARTTM RACE cDNA Amplification kit（Clontech，USA）说明书进行。以此前克隆的一个cDNA片段为基础设计引物F1/R1和F2/R2分别进行3'RACE反应的第一轮和第二轮PCR；设计引物F3/R3和F4/R4进行5'RACE反应的第一轮和第二轮PCR。将3'RACE和5'RACE第二轮PCR中的扩增片段克隆至pGEM-T easy载体（Promega，USA）并经测序验证，最后将5'RACE、3'RACE片段以及最初的cDNA片段进行拼接，得到TabZIP3全长cDNA序列。根据拼接后的TabZIP3全长cDNA序列设计引物（F5/R5）扩增TabZIP3全长cDNA，将扩增产物连接至p GEM-T easy载体并经测序验证。引物序列见表1，由生工生物工程（上海）有限公司合成。