《表2 各菌属引物信息:玫瑰痤疮与肠道菌群紊乱的相关性研究》

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《玫瑰痤疮与肠道菌群紊乱的相关性研究》


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将质粒标准品连续10倍梯度稀释,获得102~1012个拷贝/ml的标准品作为模板,行荧光定量PCR。其反应体系为20μl:SYBR Green Master Mix10μl,上下游引物各0.5μl,模板DNA 2μl,ddH2O7μl;反应条件:95℃变性5min;95℃变性10s、退火温度(见表2)20s、72℃延伸30s,共45个循环;反应完毕后进行溶解曲线分析,根据Ct值建立标准曲线。待测样品DNA稀释后,体系与条件同上,进行荧光定量PCR检测肠道菌群中双歧杆菌、肠球菌、肠杆菌、拟杆菌、梭杆菌和乳酸杆菌的拷贝数量,同时计算双歧杆菌与肠杆菌比值(B/E值),B/E值<1提示患者肠道抗定植能力弱,肠道菌群紊乱;B/E值>1,则提示患者肠道抗定植能力强。