《表2 各种提取剂对2%氨基酸含量大豆蛋白复合纤维的提取效果》

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《基于酶联免疫分析的大豆蛋白复合纤维鉴定方法》

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样品的前处理对于鉴定方法至关重要。蛋白纤维免疫学分析遇到的最大问题是免疫分析必须在中性的水溶液中进行，而蛋白纤维却很难溶解于中性的水溶液。研究发现，高温浓度为7 mol/L的尿素对变性蛋白具有良好的提取效果，稍加稀释后即可用于免疫分析[17-18]。各种提取剂对2%氨基酸含量大豆蛋白复合纤维的提取效果见表2（以抑制率表示）。结果证明，常用的蛋白提取液如Tris-HCl和PBS都无法有效的溶解大豆蛋白复合纤维。大豆蛋白复合纤维氢氧化钠溶液虽然可以溶解，但ELISA检测必须是中性体系，调节pH值至中性后，改性的蛋白会析出。7 mol/L尿素对大豆蛋白复合纤维具有良好的提取效率，经20 min提取，含有2%氨基酸含量的大豆蛋白复合纤维即可被检测为阳性。该提取液在提取30 min时抑制率达到最大值，随后延长时间目标肽段水解，抑制率降低，所以采用7 mol/L尿素提取30 min为最佳提取条件。