《表3 荧光定量引物序列》

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《芒果MinSPS1基因的克隆及表达载体的构建》


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利用Bio-Rad公司CFX96实时定量PCR仪进行实验及数据分析。荧光定量所用酶为TransStart Tip Green qPCR SuperMix,反应体系10μL(模板1μL,上下引物各0.3μL,SuperMix 5μL,ddH2O补齐至10μL),样品设3次重复。反应程序为:95℃先预变性7min,然后在95℃5s,60℃30s下扩增40个循环,然后60℃30 s,20℃停止。溶解曲线在60℃~95℃下进行数据采集。设计好内参基因MINACTIN和基因MinSPS1荧光定量引物(表3)。