《表1 引物序列、预期产物长度及退火温度》

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《耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的耐药基因分析》

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严格按照生工PCR反应试剂盒（批号:B532073）说明书操作，ATCC25922为阴性对照，KPC和IMP阳性对照为本实验室自制（PCR反应证实）。反应体系共50μL，反应条件:94℃预变性5 min；94℃45 s，54℃45 s，72℃l min，共30个循环；最后72℃延伸10 min，引物序列（上海生工合成）和退火温度见表1。PCR扩增后产物用1.5%琼脂糖（含终浓度0.5μg/m L溴化乙锭）凝胶电泳，电压137 V，电泳30～35 min后置于紫外透射反射分析仪上观察，在凝胶成像系统上成像。