《表1 LncRNA引物序列》

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《骨形态发生蛋白9调节乳腺癌细胞中长链非编码RNA的表达》

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在用微阵列芯片及相应的辅助软件分析出MDA-MB-231/BMP-9和MDA-MB-231/GFP细胞中有差异表达的LncRNA后，本研究中进一步采用实时荧光定量PCR法验证差异有统计学意义的LncRNA在MDA-MB-231细胞中的真实表达情况，以排除假阳性结果。提取MDA-MB-231/BMP-9及对照组MDA-MB-231/GFP细胞总RNA，实验流程同1.3节；用c DNA反转录试剂盒合成c DNA模板，参照说明书取1μL模板进行PCR扩增（引物全部由南京金斯瑞生物科技有限公司合成，引物序列见表1）。PCR扩增条件:95℃预变性30 s；95℃变性5 s、55℃退火30 s、72℃延伸10 s，共40个循环；以GAPDH基因为内参照。所得的产物用溶解曲线来评估，用2-ΔΔCt值表示相应LncRNA在BMP-9过表达组和对照组细胞中的表达情况。实验重复3次。