《表1 反转录-聚合酶链式反应使用的引物》

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《沈阳市鼠携带汉坦病毒G2片段基因分型及序列特征分析》

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分两轮进行。第1轮反应体系使用Promega一步法RT-PCR试剂盒（A1250），5×Buffer 10μl、25 mmol/L MgSO44μl、10 mmol/L dNTPs1μl、正、反向外套引物（MOF、MOR）各1μl、AMV 1μl、Tfl 1μl、RNA酶抑制剂0.5μl、ddH2O 25.5μl、模板RNA 5μl，第1轮反应条件:42℃45 min，94℃4 min，94℃30 s，52℃30 s，72℃30 s，35个循环；72℃10min。第2轮反应体系使用Promega PCR反应试剂盒（M7132），Mix 25μl、正、反向内套引物（HTNMF、HTNMR；SEOMF、SEOMR）各2μl、ddH2O 17μl、第1轮PCR产物4μl，第2轮反应条件:94℃2 min，94℃30s，55℃30 s，72℃30 s，35个循环，72℃10 min。引物由Invitrogen公司合成。实验用引物见表1。