《表1 miR-672-5p的引物》

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《长效、中效、短效3种激素影响miR-672-5p在大鼠成骨细胞的差异表达》

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（1） 细胞总RNA提取:激素干预大鼠成骨细胞48 h后，弃孔内培养基，提取总RNA。（1）用微量移液器将培养瓶/板中培养液吸除干净，加入1 m L 4℃预冷的PBS，轻摇洗涤；（2）用微量移液器将PBS吸Te除mp干erat净ure（；℃ （3）） 加入1 mL的Trizol试剂，轻缓振荡或用枪头吹打，破碎细胞；（4）将液体转移到灭过菌的1.5 mL离心管内；（5）加入250μL三氯甲烷，颠倒离心管15 s，充分混匀，静置3 min；（6）4℃下13 000×g离心8 min；（7）将上清转移到一新的离心管中，加入0.8倍体积的异丙醇，颠倒混匀；（8）-20℃放置15 min；（9）4℃下13 000×g离心10 min，管底的白色沉淀即为RNA；（10）吸除液体，加入体积分数75%乙醇1.5 mL洗涤沉淀；（11）4℃下13 000×g离心5 min；（12）将液体吸除干净，将离心管置于超净台上吹3 min；（13）加入20μL无RNA酶的水溶解RNA。mi R-672-5p引物设计与合成见表1。