《表1 人转铁蛋白大规模纯化的方法》

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《人转铁蛋白的分离纯化及临床应用进展》

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转铁蛋白的分离纯化方法包含乙醇沉淀、利凡诺沉淀、硫酸铵沉淀、PEG沉淀和离子交换层析等[18～27]。早期主要使用沉淀法，后来随着层析技术的发展，层析技术逐渐代替沉淀法或与沉淀法共同使用提高纯度及回收率。同时，为了转铁蛋白能够用于临床或者在药品生产过程中作为生化试剂，更多的生产工艺都会加入病毒灭活的步骤，达到安全的效果。表1总结了至今转铁蛋白大规模生产工艺的发展情况，生产工艺从早期的沉淀法演变到后来的层析法，纯度和回收率也有显著提升，并加入病毒灭活步骤，保证安全性。例如，von Bonsdorff和Parkkinen等利用PEG沉淀、一步阳离子交换层析和一步阴离子交换层析，加入有机溶剂/表面活性剂法（solvent/detergent，简称S/D）病毒灭活和纳滤步骤，得到纯度>98%的转铁蛋白[23，24]。MacCann等[25]以Cohn FII+III上清液为原料，经过两步的阴离子交换层析来纯化得到转铁蛋白。Shabtai[26]以Cohn FIV-1悬浮液为原料，经过PEG沉淀和二步阴离子交换层析，再经过60℃10 h病毒灭活，得到转铁蛋白。Ascione等[27]以Cohn FIV-1+FIV-4为原料，经过一步阴离子交换层析和两步病毒灭活，即可得到回收率80%，纯度大于95%的转铁蛋白。