《表1 不同退火温度下噬菌体模板数与Ct值的线性方程》

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《基于噬菌体展示纳米抗体的绿色免疫PCR检测脱氧雪腐镰刀菌烯醇》

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采用梯度PCR的方法，设置模板数梯度（106、1 07、1 08、1 09、1 01 0 P F U/m L）和退火温度梯度（55～65℃），配制PCR体系后进行扩增。结果表明，定量PCR特异性良好，熔点曲线只存在单一峰（图4）。P-28噬菌体定量PCR扩增曲线如图5所示，作出每个退火温度下，模板数的对数（X）与Ct值（Y）的相关性曲线，如表1所示，起始模板数越多，Ct越小，并且每个模板的Ct值与模板数的对数值存在线性关系。对比不同退火温度下的相关系数R2和扩增效率，当退火温度65℃时，R2为1且扩增效率达96.33%，表明在退火温度65℃条件下，PCR的稳定性和重复性较好。因此，在后续实验中，退火温度均设为65℃。