《表2 实验用抗体Tab.2 Antibodies used in the experiment》

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《人ether-α-go-go钾通道减少肝脏的内质网应激和凋亡》


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h ERG:human ether-a-go-go related gene;CHOP:C/EBP-homologous protein;caspase 3:cysteine aspartyl protease 3;BIP(GRP78):binding immunoglobulin protein;ATF4:activating transcription factor 4;pJNK:phosphorylated-c-Jun N-terminal kinase;JNK:c-Jun N-terminal

采用BCA蛋白分析试剂盒(中国碧云天公司)测定蛋白浓度。取80μg总蛋白进行10%(质量分数)的SDS-PAGE电泳,湿转(200 m A,120 min)至硝酸纤维膜上。用TBST配制的5%(质量分数)的脱脂奶粉室温封闭1.5 h,用封闭液将一抗稀释后与膜在4℃摇床孵育过夜,次日用TBST洗膜3次,每次5 min,再与辣根过氧化物酶(horseradish Peroxidase,HRP)标记的二抗(1∶2 000)室温孵育1 h。TBST洗涤,滴加增强化学发光(enhanced chemiluminescence,ECL)发光液后用Chemi-Doc Touch凝胶成像系统(美国Bio-Rad公司)显影成像,并用Image J软件对图像进行灰度分析。所用抗体,详见表2。