《表1 RT–PCR所用引物》
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《硝态氮对组培‘嘎拉3’叶绿素合成及相关基因表达的影响》
分别取两种培养基处理后0,7,14,21,28 d的组培‘嘎拉3’叶片,置于液氮中速冻后放–80℃冰箱备用。总RNA的提取用TIANGEN(天根)试剂盒,然后进行琼脂糖凝胶电泳,证实RNA有18S和28S两条明显的完整条带。以提取的RNA为模板,用反转录试剂盒PrimeScript TM RT reagent Kit with gDNA Eraser(Perfect Real Time,Ta KaRa)进行反转录获得cDNA,采用SYBR?Premix Ex Taq TM(Tli RNaseH Plus)试剂盒(宝生物)进行荧光定量PCR反应。引物设计在Phytozome 10.3中找到基因的序列,采用软件DNAMAN设计荧光定量特异性引物(表1)。最终采用Comparative CT(2–ΔΔCt)法进行数据分析[22]。
图表编号 | XD0039903000 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2019.04.01 |
作者 | 文滨滨、张新昊、沈红艳、陈修德、高东升、朱翠英、肖伟 |
绘制单位 | 山东农业大学园艺科学与工程学院、山东农业大学园艺科学与工程学院、山东农业大学园艺科学与工程学院、山东果蔬优质高效生产协同创新中心、山东农业大学园艺科学与工程学院、山东果蔬优质高效生产协同创新中心、山东农业大学园艺科学与工程学院、山东农业大学园艺科学与工程学院、山东果蔬优质高效生产协同创新中心、山东农业大学园艺科学与工程学院 |
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