《表1 菌种基因探针分布图》

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《刃天青法检测青蒿琥酯对耐药结核分枝杆菌药物敏感性初步研究》

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注:QC:表面化学探针；BC:空白对照；EC:杂交阳性外对照探针；IC:内对照探针

菌种基因与耐药基因操作严格按照说明书操作，简要操作如下:（1）DNA提取:从改良罗氏培养基中挑取3周左右的培养物调整为约1个麦氏单位菌悬液，取20μL于核酸提取管中，加入80μL的核酸裂解液，充分混匀震荡10min，放金属浴10min，12000r/min离心1min，即为待测模版。（2）基因扩增:将菌种基因芯片扩增试剂复温并加18μL入八连管中，再加入待测模版2μL，放入ABI7300扩增仪中扩增，条件设为:37℃600s；94℃600s；94℃30s，60℃30s，72℃40s，共35个循环；94℃30s，72℃60s，共10个循环；72℃420s。（3）基因杂交:将扩增产物放入95℃变性5min，再冰浴5min，即为代测产物。取出杂交缓冲液，按9μL:6μL的比例将杂交缓冲液与基因扩增产物混合，取13.5μL加入杂交芯片加样孔中，置入芯片杂交仪中进行50℃杂交2h。杂交完成后，分别进行洗涤、干燥、扫描及结果判读。芯片自带质控探针，菌种基因芯片探针分布表见表1。