《表3 常用病理方法优缺点比较》

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《黄褐斑动物模型的研究现状》

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HE染色法用于研究皮肤的一般组织病理学变化，能看到表皮层增厚，但表皮层增厚并不是黄褐斑模型的特异性表现，如皮肤损伤或光老化的动物模型也表现为表皮层增厚[67]，另有研究显示90%的黄褐斑患者皮肤HE染色结果显示皮肤萎缩[68]。出现以上矛盾现象可能是因为黄褐斑是一种慢性光损伤性疾病，而在动物实验中出现的皮肤增厚属于急性应激反应。此外，有文献报道HE染色很难用于研究黑色素细胞[68]，在HE染色时镜下见黑色素通常不呈黑色，而呈黄棕色或棕褐色，不易与其他色素区分[69]，因此，HE染色并不适宜作为判定黄褐斑动物模型的病理评价方法。Masson-Fontana染色法是利用黑色素具有还原性，能将银氨溶液中的银离子还原为金属银（即嗜银反应）的原理显示黑色素[70]，其优点在于镜下可以清楚的看到黑色素呈黑色、方法简单、操作时间短，但其缺点在于区分黑色素细胞的特异性不强。硫酸亚铁吸收法和亚铁氰化钾法利用化学的氧化还原法和吸附法使黑色素产生反应，但其只能说明黑色素细胞存在，不能与其他细胞区分，不具有特异性[71]。多巴氧化酶，又称酪氨酸酶，可催化酪氨酸氧化为多巴，然后被氧化成黑色素，黑色素细胞是皮肤组织中惟一的多巴阳性细胞。Dopa氧化酶法在镜下观察时只有黑色素细胞呈黑棕色，其他组织和细胞不着色，特异性较强，运用Dopa氧化酶法检测皮肤组织中的黑色素细胞较其他方法可靠[71]，但其看不到黑色素细胞的全貌，且用时较长、操作较繁琐。而另一种方法表皮分离的多巴染色法，可弥补Dopa氧化酶法的缺陷，其可观察黑色素细胞全貌，但却存在动物取材时需要特殊处理、实验时间长等问题。另外，国内诸多文献采用HMB45免疫组化染色法评价黄褐斑动物模型[38，46]，免疫组织化学方法是检测人体皮肤黑色素细胞特异性抗原一种非常敏感的方法，因其依赖于特异性抗原保存的完整性，所以不稳定性较大[72]。黄褐斑动物模型病理评价方法优缺点比较见表3。