《表1 Ppc ERF5基因及启动子克隆引物》
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《中国樱桃乙烯响应因子PpcERF5基因克隆与功能分析》
设计启动子克隆引物Promoter of Ppc ERF5 p1和Promoter of Ppc ERF5 p2 (表1),以樱桃基因组DNA为模板,扩增获得全长序列并连接到T载体中用于序列测定,选取多次扩增一致的序列用T4连接酶与p Green载体连接,获得p Green II 0800-LUC::Ppc ERF5启动子重组载体,利用引物Promoter of Ppc ERF5 p1和Promoter of Ppc ERF5 p2进行单菌落PCR检测,检测为阳性后,将载体转入GV3101农杆菌中,以含有启动子的工程菌液注射烟草(Nicotiana tabacum L.),共培养3 d后在其叶片表面喷0.2 g·L-1荧光素酶,借助活体成像仪(Tanon-6600,上海天能科技有限公司),以活体发光成像法进行定性分析。再分别将共培养3 d的烟草进行4°C培养2 d和喷施100μmol·L-1 ABA,采用Dual-Luciferase?Reporter Assay System (Promega,USA)试剂盒进行定量分析。
图表编号 | XD00218613700 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2021.01.20 |
作者 | 高玉迪、李可、朱友银、刘向蕾、尹亚红、王月、郭卫东 |
绘制单位 | 浙江师范大学化学与生命科学学院、浙江省特色经济植物生物技术研究重点实验室、浙江师范大学化学与生命科学学院、浙江省特色经济植物生物技术研究重点实验室、浙江省特色经济植物生物技术研究重点实验室、金华职业技术学院农学院、浙江省特色经济植物生物技术研究重点实验室、金华职业技术学院农学院、浙江师范大学化学与生命科学学院、浙江省特色经济植物生物技术研究重点实验室、浙江师范大学化学与生命科学学院、浙江省特色经济植物生物技术研究重点实验室、浙江师范大学化学与生命科学学院、浙江省特色经济植物生物技术研究重点实验室 |
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