《表2 引物探针序列:植物源可食性包装材料转基因成分检测》
参考标准《植物及其加工产品中转基因成分实时荧光PCR定性检测方法》(SN/T 1204—2003),《小麦中转基因成分PCR和实时荧光PCR定性检测方法》(SN/T 1943—2007),转基因成分检测马铃薯检测方法》(SN/T 1198—2013),《转基因成分检测玉米检测方法》(SN/T1196—2012),《水稻及其产品中转基因成分实时荧光PCR检测方法》(SN/T 2584—2010)。核酸提取的质量采用植物内源基因t RNALeu进行检测,其他物种内源基因检测包括马铃薯UPGase、大豆Lectin、玉米zein、水稻SPS、小麦Wx012,而对于可能含有的其他植物成分采用植物内源基因t RNALeu进行检测。针对最终的检测结果,植物源可食性包装材料的成分为马铃薯,针对马铃薯外源基因:FMV35S、Ca MV35S、NOS、NPTⅡ、Cry3A、CP4 EPSPS、PLRVrep、PVYcp进行检测。反应体系:10×PCR反应缓冲液:2.5μl,氯化镁(25 mmol/L Mg Cl2):2.5μl,d NTPs(2.5 mmol/L):1μl,Taq聚合酶(5 U/μl):0.2μl,引物(上游)(10 pmol/μl):0.5μl,引物(下游)(10 pmol/μl):0.5μl,探针(10μmol/L):0.5μl,DNA模板:1μl~2μl,补水至25μl。反应条件:ZEIN/Lectin:95℃,3 min,95℃,15 s,60℃,1 min,40个循环;UPGase:95℃,10 min,95℃,15 s;60℃,30 s;72℃,30 s,40个循环;t RNALeu/Wx012:95℃,3 min,95℃,15 s,60℃,1 min,40个循环;SPS:95℃,10 min,95℃,15 s,60℃,1 min,40个循环;Ca MV35S/NOS/FMV35S/NPTⅡ/Cry3A:95℃,3 min;95℃,15 s,60℃,1 min,40个循环;CP4EPSPS/PLRVrep/PVYcp:95℃,10 min;95℃,15 s,60℃,1 min,40个循环。引物探针序列见表2。
图表编号 | XD00218579400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.12.25 |
作者 | 王翀、高全、于学辉、胡都斯·艾尔肯、龚雪、雷勇辉 |
绘制单位 | 乌鲁木齐海关技术中心、新疆昌吉兴瑞农业科技有限公司、乌鲁木齐海关技术中心、乌鲁木齐海关技术中心、乌鲁木齐海关技术中心、石河子大学农学院 |
更多格式 | 高清、无水印(增值服务) |