《表1 冷却环境、冷却介质及其组合》

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《PDMS-玻璃微流控芯片上附着态HepG2细胞低温保存条件研究》

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注:表中符号组合代表相应冷却环境与介质的组合，例如“-80℃/Gas”表示在-80℃环境中以空气为冷却介质进行芯片上附着态Hep G2细胞的冻存；“G数字”表示距离液氮上方“数字”cm处的冷却环境；LN:液氮；Direct、Gas、IPA分别表示不设冷却介质以及以空气、异丙醇为冷却介质。

选择-20、-80℃冰箱、液氮罐内液氮表面上方10、20、30、40 cm位置处以及液氮内作为不同的冷却环境；设置空气、异丙醇（IPA）作为冷却介质，并与不设冷却介质组进行对比。在芯片一侧储液池中加入50μL低温保护液（10%DMSO+20%FBS+70%DMEM），待微通道两侧储液池内液面稳定后，将热电偶细丝固定于储液池内微通道的一端入口处，用封口膜、锡箔纸将芯片包裹，将包裹芯片放入50 m L空离心管以及盛有异丙醇的50 m L离心管中，然后放到不同冷却环境下进行芯片微通道内细胞冻存液降温速率的测量，待降温曲线趋于稳定后终止测量。温度测量系统如图2所示，冷却环境、介质组合如表1所示。