《表2 Gm CO扩增引物序列》

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《利用发根农杆菌体系检测大豆CRISPR/Cas9系统的靶点》

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(1）提取JRH0951载体质粒。第一次PCR：以JRH0951质粒为模板，利用Gm U6-10正义引物分别与Gm CO-1反义引物和Gm CO-2反义引物进行PCR反应，扩增Gm U6-10-g RNA片段（400 bp）。以JRH0951质粒为模板，利用Gm CO-1正义引物和Gm CO-2正义引物分别与Scoffold-Xba I反义引物进行PCR反应，扩增g RNA-Scoffold片段（83 bp）。第二次融合PCR：以Gm U6-10-g RNA和g RNA-Scoffold为模板，以Gm U6-10正义引物和Scoffold-Xba I反义引物进行Gm U6-10-g RNA-Scoffold融合PCR反应扩增片段（483 bp）。设计PCR扩增引物如表2。