《表1 近5年AFPs冷冻保存生物样品列表》

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《海源性抗冻蛋白对畜禽精子冷冻损伤的保护作用及其机制》

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目前，研究表明，向抗冻保护稀释液中加入1μg/m L的AFPⅠ可以显著改善冷冻复苏后鲤鱼精子的活力和活率[38]。在利用液氮蒸熏法冷冻保存水牛精液的试验中，添加10μg/m L赤翅甲抗冻蛋白（Dendroides canadensis antifreeze protein，DAFPs）显著提高了冻融后的精子活力[39]。CHAVES等发现，向冷冻保护剂中添加0.5～1μg/m L AFPⅢ后显著提高了冻融后的胚胎发育率[40]。AFPs作为一种新型冷冻保护剂或抗冻保护添加剂可显著改善解冻后细胞的存活率[41]。表1总结了近5年来AFPs作为冷冻保护剂或抗冻保护添加剂的研究进展。尽管AFPs可以提高冻后细胞存活率已被大量研究证实，但关于AFPs作为一种潜在冷冻保护剂依然存在争议[42-43]。例如：向鲟鱼精子冷冻保护剂中添加10μg/m L AFPⅠ，解冻后鲟鱼精子存活率升高，但与不添加AFPⅠ的对照组相比无显著差异；向水牛精子中添加10μg/m L DAFPs与不添加DAFPs对照组相比，精子解冻后存活率没有显著差异[41]；添加AFPs冷冻保存后会破坏细胞膜结构，出现细胞质泄漏和细胞存活率降低的现象[26]。这些研究结果表明，AFPs的种类、浓度以及冷冻保存方法影响了最终试验结果。因此，在试验中应根据细胞膜脂质类型，选择适合的AFPs种类、浓度、冷冻保存方法以及冷冻介质，并根据试验进行微调。