《表1 RT-PCR扩增引物序列》

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《双膦酸盐联合降糖药对2型糖尿病合并骨质疏松症大鼠BMP-2、TGF-β1、IGF-1的影响》

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取骨组织50 mg加入1 m L Trizol于液氮下充分研磨，加入氯仿0.2 m L，参照Trizol RNA提取试剂说明书提取总RNA，检测RNA浓度及纯度，加入反转录引物，反转录合成cDNA。加入相应PCR反应扩增体系（25μL），PCR热循环仪扩增，扩增条件:96℃预变性5 min；94℃变性30 s，50℃退火30 s，70℃延伸30 s，45次循环扩增。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳，图像分析软件分析条带密度，采用2-△△Ct法计算基因的相对表达量。引物设计见表1。