《表2 x,y变量组合表:绵羊肺炎支原体对肺上皮细胞自噬影响的研究》

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《绵羊肺炎支原体对肺上皮细胞自噬影响的研究》


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P62和Atg7 si RNA序列由上海吉玛公司设计并合成(表2)。在100μL无血清的1640中分别加入3μL1μmol/L si RNA-p62和si RNA-Atg7溶液后,加入1μL 1μmol/L si RNA储存液,混匀,室温放置5 min。再将2μL试剂盒中的si RNA-Mate加到上述混合液中,室温放置10 min,以形成si RNA oligo-si RNA-mate复合物。待12孔板中的TC-1密度达75%时,将si RNA oligo-si RNA-mate复合物缓慢加入细胞培养孔中,混匀,37℃5%CO2培养48 h,经1.4的western blot检测P62和Atg7蛋白的表达水平,同时设空白对照(Control)、阴性对照-si RNA对照组(NC)。利用灰度值做图分析TC-1细胞中各si RNA对P62和Atg7基因表达的沉默效果。