《附表1 质谱仪测定12种叶酸参数设置》

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《谷子穗发育期转录组与叶酸代谢谱联合分析》

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参考Wan等[18]方法提取叶酸。5 g样品粉末沸水浴10 min，迅速转移至冰上；加入15μLα-淀粉酶（30 min，37℃）和20μL蛋白酶（60 min，37℃）后离心（4℃，10，000?g，20 min），取上清液20μL过滤后进行液相色谱-串联质谱法（high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry，HPLC-MS/MS）分析。使用Agilent 1260 HPLC系统和Agilent分析柱（Poroshell 120 SB-C18，2.1 mm×75.0mm，2.7μm）进行色谱分析，在4℃下进样15μL，柱温箱温度保持在25℃。流动相为0.1%（v/v）水甲酸和0.1%（v/v）乙腈甲酸，流速0.3 m L min-1，梯度程序为20 min。使用Agilent 6420三重串联四极杆液质联用系统与电子喷雾电离界面进行叶酸的分析和定量。质谱仪（MS）在阳离子模式下运行，使用Agilent Mass Hunter软件采集并分析数据，12种叶酸化合物作为内标进行定量分析（测定参数见附表1）。