《表1 Real-time PCR引物序列》

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《LncRNA-MALAT1通过miR-142-3p/TEAD1分子轴调控结直肠癌细胞增殖与凋亡》

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通过TRIpure提取各组细胞总RNA，将1μg RNA加入至20μL混合反应体系中反转录至c DNA，采用ExicyclerTM96荧光定量PCR仪进行Real-time PCR检测与分析。引物序列见表1。PCR反应体系20μL:c DNA模板1μL，上下游引物（10μmol/L）各0.5μL，SYBR GREEN mastermix 10μL，dd H2O 8μL。Lnc RNA-MALAT1基因检测反应条件：94℃变性10 s，60℃退火20 s，72℃延伸30 s，40个循环；mi R-142-3p基因检测反应条件：94℃变性15 s，60℃退火15 s，72℃延伸15 s，40个循环。mi R-142-3p基因检测以U6基因作为内参，Lnc RNA-MALAT1基因检测以β-actin基因作为内参，采用2-ΔΔCt方法计算目标基因的相对表达水平。