《表1 qRT-PCR引物序列》

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《lncRNA NEAT1在急性髓系白血病患者外周血中的表达及其与预后的关系》


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采用RNA提取试剂盒提取外周血单个核细胞总RNA,用紫外分光光度计检测总RNA浓度及纯度。反转录得到的cDNA置于-20℃保存备用。采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测lncRNA NEAT1的表达。qRT-PCR反应采用10μl体系:mi Script SYBRGreen Mix 5μl,cDNA(50 ng·μl-1)1μl,上下游引物(10μmol·L-1)各0.5μl,dd H2O 3.0μl。反应条件设置为:95℃90 s,95℃30 s,63℃30 s,72℃15 s,40个循环。lncRNA NEAT1及内参18S rRNA的引物序列见表1。采用2-ΔΔCT法对外周血单个核细胞中lncRNA NEAT1的相对表达水平进行定量分析。