《表2 被测基因引物序列信息》

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《Ezh2通过维持线粒体ATP合成功能促进骨骼肌细胞分化》


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经观察,Ezh2基因敲除小鼠的体型较小、体质量较轻,精神状态、毛发光泽度、饮食以及活动情况如常,但敲除小鼠出生后死亡率较同窝对照组高,繁殖能力下降。敲除小鼠前肢出现向内曲屈畸形。取6周龄小鼠进行实验。经检测,敲除组小鼠骨骼肌中Ezh2(t=3.327,P=0.029 2)和H3K27me3(t=4.330,P=0.012 3)的蛋白含量降低,表明成功构建了Ezh2基因敲除小鼠(图1A,均P<0.05)。小鼠骨骼肌切片HE染色结果显示,敲除组肌纤维粗细不等,核一般在周边,但部分细胞核发生内移现象,如图1B右图绿色箭头所指处,此为病理性改变。小鼠骨骼肌分化相关基因中Myogenin(t=7.822,P=0.001 4,校正t检验)和MhcIIb(t=4.668,P=0.043 0,校正t检验)的mRNA表达均明显减少(均P<0.05;图1C),差异有统计学意义,其余基因表达差异无统计学意义。敲除组Myogenin(t=9.126,P=0.000 8)蛋白表达量下降,差异有统计学意义,但Desmin(t=1.767,P=0.152 0)和Myosin(t=2.241,P=0.088 5)蛋白表达差异无统计学意义(图1D)。