《表1|RT-PCR引物序列》

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《血小板衍生生长因子BB诱导大鼠骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化》

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收集对照组及血小板衍生生长因子BB干预组细胞，PBS洗2遍，加入1 m L Trizol裂解，充分混匀，室温放置5 min，加入500μL氯仿，剧烈振荡，静置后12 000 r/min离心10 min，取上层水相于新EP管中，加入500μL异丙醇，颠倒混匀，室温放置10 min，12 000 r/min离心10 min，弃上清，加入1 m L无水乙醇，涡旋混匀，12 000 r/min离心5 min，弃上清，室温干燥约40 min，用30μL DEPC水溶解，测定其纯度、浓度，选择纯度值>1.8的总RNA，然后反转录获得c DNA，用SYBR Green试剂盒检测细胞Runx-2和Gli-2 m RNA的表达，反应体系为20μL，退火温度为55℃。实验重复3次。结果应用公式X=2-ΔΔCT法分析。引物序列见表1。