《表2.本研究中使用的引物》

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《Streptomyces sp. NO1W98中杀黑星菌素的分离和生物合成基因簇的鉴定》


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限制性核酸内切酶和DNA Marker等购自上海生工生物工程有限公司;高保真DNA聚合酶购自Trans Gen公司;长片段DNA的扩增使用宝生物公司的Prime STAR?GXL DNA Polymerase;DNA回收试剂盒和质粒提取试剂盒购自上海生工生物工程有限公司。其他常规试剂均为国产分析纯级产品,各种抗生素均购自国内的试剂公司,使用浓度为氨苄青霉素(Ampicillin,Amp) 100μg/m L,卡那霉素(Kanamycin,Kan)50μg/m L,安普霉素(Apramycin,Apm) 50μg/m L,氯霉素(Chloramphenicol,Cml) 25μg/m L,甲氧苄氨嘧啶(Trimethoprim,Tmp) 50μg/m L。PCR引物由上海生工生物工程有限公司合成,DNA测序由上海生工生物工程有限公司完成。Eppendorf5331梯度PCR仪,Eppendolf 5810R台式大容量多功能冷冻离心机,Eppendolf 5418小型台式高速离心机,BIO-RAD Molecular Image Gel DocTM XR+Imaging System凝胶成像系统,SONICS超声波破碎仪VCX-130,Eppendorf Concentrator plus旋转浓缩仪,Heidolf Laborota4000 eco/WB/G3旋转蒸发仪,Agilent 1260 infinity高效液相色谱仪(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),分析型色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(150 mm×4.6 mm,5μm),Bruker ma Xis超高分辨液质联用仪,Bruker AVANCE DRX 500 M核磁共振波谱仪(500/125 MHz,TMS为内标)。