《表4 定量PCR引物：脓肿分枝杆菌ABC转运家族耐药外排泵发掘》

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《脓肿分枝杆菌ABC转运家族耐药外排泵发掘》

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采用上海迈根生物公司提供的细菌总RNA提取试剂盒提取脓肿分枝杆菌总RNA，具体操作按试剂盒说明书进行。反转录根据天根公司Fast Quant c DNA第一链合成试剂盒进行反转录，总RNA使用量为1μg。定量PCR采用Biomake公司（美国）的2×SYBR Green q PCR Master Mix配制20μL的反应体系进行实验，操作按说明书进行。rpo B等q-PCR引物采用Primer 3网站设计，由捷瑞公司合成（表4）。定量PCR程序为：预变性：95℃，15 min；循环：变性95℃10 s，退火60℃20 s，延伸72℃20 s，共40个循环，最后进行融链曲线分析。基因表达相对定量采用2-ΔΔCt方法计算，内参基因为rpo B。