《表1 HMGB1基因多态性引物设计》

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《PD-1、TIM-3及HMGB1基因多态性在老年肺结核病人中的表达及与肺功能的相关性研究》

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采用高通量测序法完成HMGB1基因的单核苷酸多态性（SNP）位点检测，分析2组SNP基因型、等位基因频率存在的差异。（1） SNPs的挑取:查阅生物信息数据库，结合既往研究报道确定HMGB1基因rs1045411、rs2249825、rs1412125 3个SNPs；（2）基因序列的确定:参考Genebank获得HMGB1基因多态性引物序列，见表1；（3） DNA扩增反应条件:设置PCR参数为30℃10 min，42℃30 min，99℃5 min，5℃下5 min，连续进行35个循环，72℃10 min延长，获得最终产物并放入1.5%琼脂凝胶电泳，β-actin为内对照；（4）测序:配置浓度为2%琼脂糖凝胶，将PCR扩增产物与凝胶充分混合、电泳，给予溴乙锭染色并完成电泳，拍照[10]。