《表2 干扰实验用引物:中华绒螯蟹水通道蛋白1基因的克隆、表达及RNA干扰研究》

《表2 干扰实验用引物:中华绒螯蟹水通道蛋白1基因的克隆、表达及RNA干扰研究》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《中华绒螯蟹水通道蛋白1基因的克隆、表达及RNA干扰研究》


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使用基因特异性引物AQP1-R1,AQP1-F1,AQP1-R2,AQP1-F2,AQP1-R3,AQP1-F3,AQP1-R4和AQP1-F4进行dsRNA制备DNA模板5端(表2).作为对照,选取模板需带有绿色荧光蛋白(GFP)载体,引物扩增GFP dsRNA需具有T7启动子序列,如表2所示.PCR产物通过TIANprep Mini Plasmid Kit(天根生化科技,中国)纯化并用作模板.用T7高效转录试剂盒(TransGen Biotech,中国)合成AQP1(dsRNA 1,2,3,4,5)和GFPdsRNA.合成的dsRNA利用琼脂糖电泳验证,再利用紫外分光光度计测定其浓度.