《表3 不同退火温度对扩增的影响》

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《3种菊花病毒/类病毒实时荧光定量RT-PCR检测体系的构建与准确性评价》

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注：CVB.菊花B病毒；TAV.番茄不孕病毒；CCh MVd.菊花褪绿斑驳类病毒

不同退火温度对CVB、TAV和CCh MVd 3种病毒/类病毒低浓度参考品（浓度为1.0×104拷贝/m L）的检出率有影响（表3）。退火温度为58℃时，CVB、TAV和CCh MVd的检出率分别为95%(19/20）、90%(18/20）和95%(19/20）；退火温度为60℃时，3种病毒/类病毒低浓度参考品的检出率均为100%(20/20）；在退火温度为62℃时，3种病毒/类病毒的低浓度参考品的检出率均较低，分别为CVB85%(17/20）、TAV 90%(19/20）和CCh MVd 80%(16/20）。确定最适退火温度为60℃，在此温度下，3重PCR检测体系对1.0×104拷贝/m L的低浓度参考品的检出率均为100%。