《表1 引物序列:二十二碳六烯酸对房颤大鼠心房纤维化的影响》

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《二十二碳六烯酸对房颤大鼠心房纤维化的影响》


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实验第18天,取50~100 mg大鼠心房组织,应用超纯RNA提取试剂盒,按产品说明书提取组织样本中总RNA,根据A260/A280比值分析RNA纯度,A260/A280比值在1.9~2.1之间表明RNA纯度较高,符合实验要求。应用DNase 1试剂盒,按产品说明书对RNA中残留的基因组DNA进行消化处理。Ⅰ型胶原及内参基因GAPDH引物设计通过检索基因文库,按照引物设计原则,由上海生工生物工程公司合成,引物序列见表1。应用Ultra SYBR Mixture(With ROX),按产品说明书进行扩增,扩增程序为:95℃10 min,(95℃15 s,60℃60 s) ×45个循环,每个待测基因设置3个重复。实验数据采用2-△△Ct法进行相对定量分析,计算各样品目的基因相对定量结果。