《表2 PCR扩增所用引物及相关信息》

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《贵州小麦品种(系)粒重相关基因TaCwi-A1、TaSus2-2B和TaGW2-6A等位变异类型鉴定》


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利用前人已开发的分子标记检测TaCwi-A1、TaSus2-2B和TaGW2-6A基因的等位变异,所用分子标记引物的相关信息如表2所示,由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。以上述提取的DNA为模板进行PCR扩增。反应体系20.0μL:10×PCR Buffer 2.0μL,2.5 mmol/L dNTPs 0.4μL,25 mmol/L MgCI21.6μL,10μmol/L正、反向引物各1.0μL,2.5 U/μL Taq DNA聚合酶0.5μL,50ng/μL DNA模板2.0μL,用ddH2O补足至20.0μL。将反应体系置于T100 PCR仪上进行PCR扩增。扩增程序:94℃预变性3 min;94℃30 s,退火温度和时间见表2,72℃1 min,进行30个循环;72℃延伸10 min。