《表1 实时荧光定量PCR引物序列》

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《miR-34a及其下游基因在铁超载大鼠非酒精性脂肪肝发生过程中的作用》

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分别取每只大鼠新鲜冰冻肝组织25 mg，使用mi RNeasy Mini试剂盒提取总RNA，测定RNA纯度及浓度后，根据High Capacity c DNA RT逆转录试剂盒使用说明将RNA样品逆转录为c DNA。再以c DNA为模板，使用POWER SYBR GREEN试剂盒，进行实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，q PCR）。反应条件为:95℃、10 min；95℃、15 s；60℃、60 s（40个循环），分别采用U6和β-actin为内参照基因进行校准。用2-△△CT法计算目的基因的表达量，△△C T=（CT，实验组目的基因-CT，实验组内参）-（CT，对照组目的基因-CT，对照组内参）。相关引物序列见表1。