《表1 GAPDH、C3、C1q、CfB、CRIg引物》

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《白纹伊蚊rAlb-34k2蛋白诱导小鼠皮肤补体固有成分及CRIg的变化》

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注：GAPDH内参引物为本实验室设计；C3引物引自文献[13]；C1q、CRIg、CfB引物引自文献[14]。以上引物均由上海生工生物公司合成。

PCR检测补体相关基因mRNA的表达采用SYBR-Green染料法检测rAlb-34k2蛋白刺激后细胞标本和皮肤组织标本中补体相关基因的表达水平。相关引物序列见表1。反应条件为：95℃预变性5min；95℃变性15s，60℃退火1min（其中C1q基因的退火温度为55℃，CfB为57℃），共40个循环。目的基因mRNA表达水平采用2-△△CT方法计算并分析实验数据。