《表1 GAPDH、MAFbx、MuRF1、FOXO3a mRNA引物序列》
(5)real-time PCR法检测右后肢缺血骨骼肌MAFbx、MuRF1、FOXO3a mRNA的表达:提取各组大鼠缺血骨骼肌肌肉组织中总RNA并检测RNA浓度,将RNA均一化至1000 ng,使用逆转录试剂盒将RNA逆转录为cDNA,逆转录设置程序为:42℃反应15 min,然后95℃反应3 min。逆转录后进行real-time PCR扩增,其步骤为:(1)预变性:95℃,10 min;(2)PCR反应:95℃,10 s变性,60℃,32 s退火延伸,40个循环。引物序列见表1,反应结束后,分析CT值,以GAPDH为内参,采用2-△△Ct方法进行mRNA相对表达量分析。
图表编号 | XD00179829400 严禁用于非法目的 |
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绘制时间 | 2020.06.12 |
作者 | 陈叶飞、姜希娟、王蕊、杨正飞、吴旦斌、郭茂娟 |
绘制单位 | 天津中医药大学中西医结合学院、天津中医药大学中西医结合学院、天津中医药大学中西医结合学院、天津中医药大学中西医结合学院、天津中医药大学中西医结合学院 |
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