《表1 实时荧光定量PCR的引物序列》

《表1 实时荧光定量PCR的引物序列》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
本系列图表出处文件名:随高清版一同展现
《黄芪三七合剂通过调控Arid2-IR/NF-κB信号轴改善糖尿病肾病小鼠肾炎症反应》


  1. 获取 高清版本忘记账户?点击这里登录
  1. 下载图表忘记账户?点击这里登录

取小鼠肾组织0.05 g,用总RNA提取试剂盒提取RNA,Thermo Fisher NANODROP 2000分光分度计上检测RNA浓度,按照Go ScriptTMReverse Transcription System(A5001)说明书进行逆转录操作。cDNA合成反应体系为:RNA 2.5μg,Primer Oligo(d T)1μL,Random Primer 1μL,Nuclease-Free Water定容到5μL,混匀离心,70℃5 min,冰浴5min,离心10 s;之后按照说明书制备逆转录反应体系:5×Reaction Buffer 4μL,PCR Nucleotide Mix 1μL,Go ScriptTMReverse Transcriptase 1μL,Mg Cl2(Final concentration 2.5 m M)1μL,Nuclease-Free Water 8μL,轻打混匀。将c DNA 5μL和逆转录体系15μL混合,离心后25℃5 min,4℃1 h,70℃15 min,反应完毕加入80μL Nuclease-Free Water稀释样品,-20℃保存备用。Light Cycler480 II上检测Arid2-IR、TNF-α、MCP-1和IL-1β的表达量,引物信息如表1,检测到的基因相对水平用β-actin正常化。