《表1 Real-Time PCR Primers and Conditions》

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《CDC6 mRNA在弥漫大B细胞淋巴瘤中表达及其临床意义的研究》


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收集DLBCL患者术后或者活检的石蜡标本，取切片组织（5～20μm)3～4片，采用RNeasy FFPE Kit(Qiagen）和SuperScriptTMⅢFirst-Strand Synthesis SuperMixforqRT-PCR(Thermo Fisher）对上述细胞分别进行总RNA提取以及第一链cDNA合成，具体步骤参照试剂盒说明书。采用Primer Premier 6.0软件进行定量PCR目的基因及内参引物设计，并由生工生物工程（上海）股份有限公司负责合成，其序列见表1。采用Power SYBR Green PCR Master Mix(Applied Biosystems）进行qPCR，反应体系：Power SYBRGreen Master Mix 10μL，上下游引物各0.5μL，cDNA模板1.0μL，补充SDW至20μL。反应条件为95℃预变性1 min、95℃变性15 s、63℃退火延伸25 s，进行40个循环。每个样品重复3次，CDC6 mRNA相对表达量采用2-△△Ct的方法计算获得。

图表编号XD00178529900    严禁用于非法目的
绘制时间2020.03.08
作者沈明芳、李园、郭志琴、郭晓珺、曾惠
绘制单位浙江省嘉兴市第一医院血液科、浙江省嘉兴市第一医院血液科、浙江省嘉兴市第一医院病理科、浙江省嘉兴市第一医院血液科、浙江省嘉兴市第一医院血液科
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