《表1 反应器培养猪瘟病毒全过程》

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《激流式生物反应器制备猪瘟高效细胞苗》


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本次反应器前期ST细胞培养试验参照安普反应器厂家提供的工艺技术及参数完成,ST细胞上罐数量为2.01×109个细胞。由于细胞培养过程中纸片载体无法实时观察细胞的状态与生长情况,只能通过每天定时取样检测培养基的耗糖值与调碱量来判断细胞的情况。表1表明,细胞上罐后第1 d,由于细胞数量少,且经过胰酶消化,细胞状态还没有完全恢复,此时生长速度较缓慢,耗糖值较低;培养至第3 d,细胞耗糖值上升至2.18 mmol/L。试验设立10 L转瓶对照组,细胞1:5分种后培养48 h已长满单层。2.2接毒情况反应器上罐后第3 d,耗糖值上升至2.18 mmol/L。前期预试验数据表明,耗糖值大于2 mmol/L时细胞已经适合接种,完成脾毒接毒工序。大兔脾毒按0.5%接毒量共计2 L接入灌注袋中,关闭蠕动泵,使得灌注袋内的纸片载体浸润在2 L脾毒中,吸附1 h后,开启蠕动泵。