《表1.土壤物理化学属性测定》

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《顺北典型油气藏上方土壤甲烷氧化菌菌群特征及其勘探意义》

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顺北地区的地貌以荒漠为主，砂土中细菌含量较少。将样品放入甲烷氧化菌培养基富集后再对DNA进行提取。贫瘠的地貌环境导致DNA浓度提取较低，因此本实验中采取SDS结合酚氯仿法[6]和DNA提取试剂盒法两种方法比较DNA浓度和纯化效果。将提取到的DNA溶解于50μL的dd H2O，通过微量紫外分光光度计（NanoDrop ND-1000 UV）测定DNA浓度和纯度（OD260/OD280和OD260/OD230）。针对pmoA基因的引物A189f和mb661r设置PCR反应体系25μL:1μL提取的DNA，5μL的5 GoTaq Flexi缓冲液（Promega），2.5μL的Mg Cl2（25 mol/L，Promega），0.5μL dNTPs（10 mol/L，Invitrogen），0.5μL每种正向和反向引物和0.2μL GoTaqFlexi聚合酶。PCR程序包括：95°C的初始变性5 min，35个循环的95°C 50 s，54°C 50 s，72°C 50 s，然后10 min的最终延伸72°C。