《表2 ChIP的引物序列》

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《KLF9基因腺病毒载体的构建及其脂肪酸氧化功能》

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通过经典的灌流-胶原酶消化法获得小鼠肝原代细胞并在室温下用1%甲醛处理10min，然后用ChIP细胞裂解缓冲液（10 mmol/L pH 8.0的Tris-HCl，10 mmol/L NaCl，3 mmol/L MgCl2，0.5%NP-40和蛋白酶抑制剂混合物）和ChIP核裂解缓冲液（50 mmol/L Tris-HCl，pH 8.05 mmol/L EDTA，1%SDS和蛋白酶抑制剂混合物）处理细胞。通过超声处理细胞裂解液以剪切染色质，并用对KLF9特异的抗体和非特异性IgG进行免疫沉淀。使用蛋白A/G-琼脂糖珠（Invitrogen）分离免疫沉淀物，将其洗涤，并用0.1%NaHCO3洗脱。在65℃孵育过夜并使用蛋白酶K解交联后，通过酚氯仿抽提免疫沉淀DNA片段和Input的DNA片段。纯化的DNA用于扩增小鼠PGC1-α启动子。PGC1-α的引物设计见表2。