《表2 硫酸铵沉淀对不同来源PPO提取的影响》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《多酚氧化酶的分离纯化及生理功能的研究进展》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

溶剂法的目的是用于沉淀蛋白。常用的有机溶剂有乙醇和丙酮，该方法直接应用于匀浆混合物。有机溶剂能将PPO从不同缓冲液中分离出来，由于它们会导致蛋白质结构的变化且通常需要在非常低的温度下（-20℃）进行[21]，所以有机溶剂沉淀法的应用范围有限。硫酸铵盐是目前最常用的蛋白质沉淀剂[22-24]。蛋白质表面有亲水和疏水区域，过量添加硫酸铵盐会增加其表面张力从而增加蛋白质的疏水相互作用，使其发生沉淀，这种现象称为盐析作用[25]。不同分子量大小的蛋白质所需的硫酸铵沉淀浓度不同，大多数研究结果表明50%～85%的硫酸铵盐浓度用于提取PPO的效果最佳[26-30]（表2）。盐析作用虽然会导致蛋白质构象的变化，但不会使蛋白质发生变性。为了保持酶活性，提取过程通常是在较低（4℃）温度条件下进行的，后续的试验中可通过添加SDS来提高酶活性[13]。