《表2 两种固定液4℃、24 h固定后不同脱水时间效果对比》

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《马睾丸石蜡切片制作前期处理条件的优化》


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确定4℃固定24 h能够在两种固定液中对马睾丸组织进行充分固定后,利用“2.2”项下成功固定的56个睾丸组织对比了6 h和18 h两种脱水条件。脱水条件是否成功一般很难凭直观判定,在包埋条件一致的情况下,进行切片时可以通过切片效果对脱水效果是否适宜进行判定。对脱水成功后的组织切片时,其蜡带、组织完整、组织未切碎,无皱纹,有利于后续HE染色步骤。而对脱水失败后的组织切片时,要么表现为脱水不足,能切到蜡块,但无法切石蜡内包埋的组织块,睾丸组织无法与石蜡一起切成片,要么表现为脱水过度,切片过程中组织容易切碎,无法得到完整的切片。根据以上判定依据,笔者对56个睾丸组织的脱水效果进行统计,结果显示,4%PFA 4℃固定24 h的样品在脱水时间6 h时均表现为脱水不足而失败,在脱水时间为18 h时全部脱水成功;Bouin固定液恰恰相反,在脱水时间6 h时可全部脱水成功,而在脱水时间为18 h时均表现为脱水过度而失败。两种固定液4℃固定24 h后不同脱水时间效果对比见表2。