《表4 游离型质粒接合转移体系的建立》

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《安丝菌素产生菌拟诺卡氏菌EGI80425接合转移体系的建立与应用》

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pJTU1278是衍生于pIJ101的自主复制型质粒，既含有大肠杆菌复制子ori（ColE），又含有链霉菌复制子rep（pIJ101）（He et al.，2010）。自主复制型载体与整合型载体在受体细胞内的存在方式不同，因此，需要在整合型载体接合转移体系的基础上，对受体供体数量和比例进行优化。在保持供体数量不变的情况下，以10∶1、1∶1、1∶10、1∶30、1∶100和1∶300的受体供体比例进行尝试。结果表明，在含有40 mmol/L Mg2+浓度的ISP4培养基上，供体大肠杆菌数量为1.2×107CFU，受体数量为4×105 CFU，受体/供体比例为1∶30，30℃培养20 h后覆盖，接合转移效率最高，达到6.2×10-4（表4）。